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淺述反芻獸疫病毒檢測試劑盒采用熒光探測法檢測的局限性

更新時間:2023-02-23點擊次數(shù):719
  小反芻獸疫是由副黏病毒科麻疹病毒屬的小反芻獸疫病毒引起,以發(fā)熱、眼鼻黏膜卡他性炎癥、壞死性口炎、腹瀉和支氣管肺炎為主要特征,包括野生動物在內(nèi)的小反芻動物的一種急性、烈性、致死性、高度接觸性傳染病。是嚴(yán)重危害畜牧業(yè)生產(chǎn)安全的重大動物疫病。
  小反芻獸疫病毒檢測試劑盒用于檢測羊血清中的PPRV抗體,評估養(yǎng)殖場羊小反芻獸疫疫苗免疫狀況及感染羊的血清學(xué)輔助診斷。試劑盒采用間接ELISA法,在酶標(biāo)板條微孔上預(yù)包被純化的小反芻獸疫抗原。在試驗中,加入稀釋后的待檢血清,經(jīng)過溫育后,若樣品中含有PPRV特異性抗體,則與包被板上的抗原結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后;再加入酶標(biāo)二抗,與檢測板上的抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶結(jié)合物;在微孔中加入TMB底物液,經(jīng)酶催化形成藍(lán)色產(chǎn)物,加入終止液終止反應(yīng)后,用酶標(biāo)儀450nm波長測定反應(yīng)孔中的吸光度A值。
  小反芻獸疫病毒檢測試劑盒采用熒光探測檢測方法的局限性介紹:
  樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,會出現(xiàn)假陽性結(jié)果;
  陽性對照擴增產(chǎn)物泄漏,會導(dǎo)致假陽性結(jié)果;
  樣本檢測結(jié)果與樣本收集、處理、運送以及保存質(zhì)量有關(guān);
  不同的提取方法存在提取效率差異,會導(dǎo)致假陰性結(jié)果;
  病原體在流行過程中基因突變、重組,會導(dǎo)致假陰性結(jié)果;
  試劑運輸,保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測效能下降,出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準(zhǔn)確的結(jié)果;
  本檢測結(jié)果僅供參考,如須確診請結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測手段。
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